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      摘要:金银花FlosLonicerae又名忍冬、双花,为临床常用中药,具有清热解毒、凉散风热之功效,主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等。在中成药中,金银花或以细粉直接入药,或以威廉希尔手机版的形式入药,但大部分制剂以后者的形式入药。

      目的建立金银花威廉希尔手机版中绿原酸含量的HPLC测定方法。方法国产C18柱(4.6mm×250mm,7μm);流动相为乙腈:0.4%磷酸(12∶88);检测波长为327nm;流速1ml·min-1;进样量10μl;柱温25℃。结果绿原酸在0.0716~0.6444μg范围内线性关系良好,r=0.9996;平均回收率99.99%,RSD=1.61%(n=6)。结论该方法简便、快速、准确,可用于金银花威廉希尔手机版的含量测定及质量控制。

      金银花入药有两种形式,一是以全草直接投料,煎煮入药,即以煎煮液(即药材的提取液)作为半成品(中间体);另一种是先提取有效部位,而后以威廉希尔手机版投料,即以威廉希尔手机版作为中间体(原料)(刘艳娥《第二军医大学硕士学位论文》)。为了有效控制金银花威廉希尔手机版(中间体)的内在质量,本实验参考了有关文献[2,3]及2005版《中国药典》[4]方法,采用威廉希尔手机版|威廉希尔app下载|进入含量。

      1仪器与试药Agilent1100series高效液相色谱仪(G1322A排气阀,G1311A泵,G1316A柱温箱,G1314A紫外检测器),chemistation色谱工作站,KromasilC18色谱柱,超声提取器(KQ3200DE型数控超声仪昆山市超声仪器有限公司);绿原酸对照品(中国药品生物制品鉴定所,批号110753-200212),金银花威廉希尔手机版(本实验室自制),乙腈,磷酸均为分析纯;水为双蒸水。

      2方法与结果[5]2.1分析方法的建立——分离及检测条件的选择2.1.1色谱条件色谱柱为国产KromasilC18柱(250mm×4.6mm,7μm);柱温25℃;流动相为乙腈-0.4%磷酸(12∶88);流速为1ml·min-1;检测波长327nm。

      2.1.2pH值对峰形的影响绿原酸属于有机酸类物质,在HPLC测定时易发生前沿或拖尾峰,流动相加入酸可以改善这种现象。本实验比较了水、乙酸、磷酸对峰形的影响,当选用0.4%磷酸时,可得到较好的色谱峰形。

      2.1.3色谱系统适应性实验在选定条件下,绿原酸和样品中其他组分可基线分离,绿原酸与其相邻色谱峰的分离度大于1.5,理论塔板数(N)为5000以上。

      a-对照品b-供试品2.2对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每毫升含35.8μg的溶液,即得。2.3供试品溶液的制备精密称取本威廉希尔手机版10mg,置100ml容量瓶中,双蒸水溶解,超声2min后,再用双蒸水定容至刻度,摇匀,过0.45μg微孔滤膜,取续滤液即得。

      2.4线性范围的考察及其标准曲线的绘制精密吸取对照品溶液2,4,6,10,14,18μl,分别注入液相色谱仪。按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积积分值(A)对进样量进行回归,得回归曲线方程:Y=2468.4X-16.205,r=0.9996。结果表明,绿原酸在0.0716~0.6444μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

      2.5精密度实验精密吸取对照品溶液10μl,按上述色谱条件重复进样6次,记录各组绿原酸峰面积值,结果平均峰面积为:840.5,RSD为0.69%(n=6)。

      2.6稳定性实验取同一供试品溶液,分别于0,2,4,6,8h进样10μl,测得绿原酸的平均峰面积值为:680.24,RSD为:0.38%(n=5),表明供试品溶液在8h内稳定。

      2.7重复性实验取同一批号(070204)样品6份,按含量测定方法测定,结果绿原酸平均含量为28.01%,RSD为1.07%(n=6)。

      2.8加样回收率实验精密称取已知含量的金银花威廉希尔手机版6份,分别精密添加绿原酸对照品适量,按供试品溶液的方法制备,测定,计算回收率。

      2.9样品测定取3批样品,按照上述方法制备供试品溶液,进样10μl,依照已确定的色谱条件测定,按峰面积值用外标法计算样品中绿原酸的含量。

      3讨论金银花威廉希尔手机版以有机酸为有效成分,本实验以绿原酸含量作为金银花威廉希尔手机版的质量控制指标,同时测定了3批金银花威廉希尔手机版中绿原酸的含量,通过计算,其含量均在20%以上。本文所建立的方法简便、快捷,重复性及稳定性均较好,可在实际生产中用于该威廉希尔手机版的质量控制。本文所做的工作为开发金银花的相关产品提供了质量监控方法。

      

(来源:中国化工仪器网)

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